Jaká je norma leukocytů u kočky?

Kromě hodnocení červených krvinek zahrnuje vyšetření krevních nátěrů přítomnost krevních destiček a leukocytů, především k určení nezralých neutrofilů, detekci toxických a lymfocytárních reakcí. Studium krevních destiček a leukocytů v krevních nátěrech je nejdůležitějším krokem v diagnostice zánětlivých onemocnění a příčin krvácení.

Hodnocení krevních destiček

Vyšetření trombocytů počítáním je indikováno zejména tehdy, když klinický obraz ukazuje na možnou trombocytopenii (petechie, ekchymózy – rozsáhlé krvácení pod kůži nebo sliznicí; meléna; epistachy – krvácení z nosu; hematurie atd.). Pokud není porušena funkce trombocytů, ke hemoragickým projevům obvykle dochází při poklesu trombocytů na 25–50 × 10 9 /l. Ani takový pokles však u některých zvířat nevede ke hemoragickému syndromu. To lze vysvětlit přítomností větších krevních destiček nebo zvýšením jejich aktivity. První fáze zahrnuje kontrolu přítomnosti sraženin, které se tvoří hlavně na konci nátěru. U zdravého zvířete dávají počty krevních destiček pomocí hematologického analyzátoru někdy chybně nízké výsledky kvůli tvorbě velkých sraženin, takže je nutné použít krevní nátěry pro přepočet. Tvorba krevních sraženin může být důsledkem obtížného odběru krve a nedostatečného přenosu materiálu do zkumavky s EDTA. Mohou být také způsobeny špatnou homogenizací materiálu umístěného ve zkumavce (KE Russel, CB Grindem, 2000). Ale u koček mají krevní destičky tendenci tvořit sraženiny, což často vyvolává mylnou představu, že během počítání ubývají (C. Tasker, PJ Gripps, AJ Maskin, 1999). Konečně, během hardwarového počítání jsou agregované krevní destičky někdy mylně rozpoznány jako leukocyty, což zkresluje výsledky studie.

U psů a koček se počet krevních destiček pozorovaných v zorném poli mikroskopu s velkým zvětšením (×1000) pohybuje v průměru od 10 do 30 buněk. Při vynásobení 15 x 10 9 nebo 20 x 10 9 počet buněk odpovídá obsahu 1 litru (JW Harvey, 2001). U zvířete s imunitní trombocytopenií je počet krevních destiček v mikroskopickém zorném poli obvykle snížen (foto 1a a 1b).

1a	1b
Fotografie 1a a 1b. Počítání krevních nátěrů pomocí mikroskopie (x1000). Nedostatek krevních destiček u psa s imunitně zprostředkovanou trombocytopenií 1b ve srovnání se zdravým psem 1a.

Snížení počtu krevních destiček v krevním nátěru při absenci sraženin upozorňuje lékaře na nadměrné periferní vychytávání (krvácení, diseminovaná intravaskulární koagulace – DIC atd.), poruchu tvorby v kostní dřeni nebo destrukci zprostředkovanou imunitní reakcí (Obrázek 1) (SL Stockman, M. A. Scott, 2008).

Obrázek 1. Hlavní důvody pro rozvoj trombocytopenie jsou
zvážit po konečném potvrzení krevními nátěry

Stanovení leukocytů v krevních nátěrech

Studium morfologie leukocytů v krevních nátěrech nám může poskytnout závažné informace. Velké množství hematologických analyzátorů udává celkový počet leukocytů a rozlišuje (procento ve vztahu k celkovému počtu leukocytů) na tři nebo pět částí (neutrofily, monocyty, lymfocyty, eozinofily a bazofily). U červených krvinek a krevních destiček však tyto moderní diagnostické metody často poskytují zkreslené nebo neúplné informace o morfologii leukocytů, což vyžaduje i další vyšetření krevního nátěru.

Neutrofily

Nezralé neutrofily

Při výrazném zánětlivém ložisku (pyometra, bronchopneumonie atd.) se v periferní krvi často objevují nezralé formy leukocytů. To je indikováno posunem vzorce leukocytů doleva. Tento obraz je spojen s vyjádřenou potřebou tělesných tkání pro neutrofily, navzdory skutečnosti, že zásoba zralých neutrofilů v kostní dřeni je vyčerpána.

Míra odchylky doleva se projevuje počtem nezralých neutrofilů a úrovní jejich zralosti. Nejčastěji se posun doleva projevuje zvýšením počtu nesegmentovaných (páskových) neutrofilů (buňky s pruhy) (foto 2). V přítomnosti výraznějšího ohniska zánětu je někdy pozorována přítomnost meta- a myelocytů (foto 3). Dlouhodobé přetrvávání výrazné deviace doleva, zejména v kombinaci s neutropenií (degenerativní deviace doleva), je považováno za indikátor nepříznivé prognózy. Někdy lze u zdravých zvířat pozorovat nesegmentované neutrofily.

Foto 2. Čtení krevních nátěrů pomocí mikroskopie (x1000) u psa náchylného k akutní bronchopneumonii. Přítomnost nezralého nesegmentovaného neutrofilu (buňka s pruhem) se známkami toxicity (heterogenní a bazofilní cytoplazma)	Foto 3. Odečítání krevního nátěru pod mikroskopem (×1000) u psa s pyometrou. Přítomnost myelocytu se známkami toxicity (heterogenní a bazofilní cytoplazma)

Toxické změny v neutrofilech zahrnují výskyt Doyleových tělísek, stejně jako cytoplazmatickou bazofilii, difuzní cytoplazmatickou vakuolizaci a jadernou lýzu (JW Harvey, 2001). Přítomnost toxické granulace (růžové granule obvykle chybí u zralých neutrofilů) je také indikátorem toxicity.

Doyleova tělíska jsou shluky hrubého endoplazmatického retikula, které tvoří namodralá zrna. Detekce několika neutrofilů s Doyleovými těly u kočky je považována za normální (foto 4).

Bazofilie cytoplazmy je spojena s velkým množstvím drsného a polyribozomálního retikula. Jako poslední se objevuje difuzní vakuolizace a jaderná lýza s těžkou toxémií. Typicky změna stupně toxicity doprovází posun v počtu leukocytů doleva.

Lymfocyty

Reaktivní lymfocyty

Při stimulaci antigenem (např. při očkování) lze občas pozorovat reaktivní (nebo reaktivní) leukocyty v krevních nátěrech. Tyto buňky jsou často větší velikosti s bazofilní a hojnější cytoplazmou ve srovnání s malými normálními lymfocyty. Chromatin je víceméně dobře kondenzovaný a jadérka obecně nejsou vidět (foto 5).

Velké granulózní lymfocyty

Velké granulomatózní lymfocyty naproti tomu

z malých normálních lymfocytů mají bledou, hojnější cytoplazmu a obsahují fialová granula (obrázek 6).

Tyto buňky patří k T-lymfocytům nebo přirozeným zabíječským buňkám (CD8+ imunologické markery). Jejich počet se zvyšuje s infekcí Ehrlichia canis a u chronické lymfocytární leukémie (JW Harvey, 2001).

Atypické lymfocyty a lymfoblasty

Atypické lymfocyty a lymfoblasty jsou mnohem větší než normální lymfocyty. Chromatin v jejich jádrech s jasně definovanou a slabě koncentrovanou granulací. Lymfoblasty kromě výše uvedených obsahují vyčnívající jadérka (foto 7). V malém množství může být jejich přítomnost způsobena zánětem. Zvýšení jejich počtu může naznačovat akutní lymfoblastickou leukémii nebo lymfom 2010. stadia (lymfom s infiltrací kostní dřeně přes neoplastické lymfocyty). Morfologicky může být obtížné odlišit lymfoblasty od blastů objevujících se z jiných buněčných linií, jako jsou myeloblasty. Pro konečnou identifikaci se používají moderní imunocytochemické metody a specifická cytochemická barvení (přímo na nátěrech) (JA Ramos-Vara, AC Avery, PR Avery, XNUMX).

Foto 7. Čtení krevních nátěrů pod mikroskopem (×1000) u psa náchylného k akutní lymfoidní leukémii. Je zaznamenána přítomnost lymfoblastů s vyčnívajícími jadérky a granulárním chromatinem se slabou kondenzací	Foto 8. Čtení krevního nátěru pod mikroskopem (×1000) u psa. Morula Ehrlichia spp. (šipka) pozorováno u zralého neutrofilu

Inkluze

V leukocytech lze nalézt mikroorganismy, jako např Ehrlichia spp., reprezentovaný morulou v monocytech nebo granulocytech (foto 8).

Žírné buňky (žírné buňky)

Žírné buňky jsou obvykle identifikovány na konci a okraji nátěru. Od bazofilů je lze odlišit kulatým jádrem a velkým množstvím tmavých inkluzí ve formě granulí, které mohou jádro maskovat. Mastocyty se nacházejí při zánětu (hypersenzibilizace), stejně jako při neoplastických procesech (systémový mastocytom).

Vyšetřením krevních destiček a bílých krvinek v krevním nátěru lze rychle diagnostikovat řadu onemocnění, jako je trombocytopenie nebo hematopoetická neoplazie (například akutní lymfoblastická leukémie). V některých případech včasné stanovení konečné diagnózy výrazně zlepšuje prognózu a rychle vede k volbě terapie. Navíc to umožňuje posoudit závažnost zánětu nebo objasnit prognózu pro zvíře v kritickém stavu.

Základy

— Při absenci dysfunkce krevních destiček se hemoragický syndrom projevuje při poklesu počtu krevních destiček na 25–50×10 9 /l.
— Při těžkém zánětu se v krevních nátěrech vždy nacházejí nezralé neutrofily.
— U koček je přítomnost několika neutrofilů s Doyleovými tělísky normální.
— Atypické lymfocyty a lymfoblasty nacházíme ve velkém množství u akutní lymfoblastické leukémie a lymfomu v pátém stadiu.
— Na psí ehrlichiózu morula Ehrlichia spp. může přetrvávat v monocytech nebo granulocytech.

SVM č. 5/2010
Horní foto: Freepik